Sel TGuide / Tisu / Tanduran RNA Kit

Lisis sel-1 utawa homogenisasi ora cukup

---- Kurangi panggunaan conto, tambahake jumlah buffer lisis, tambahake homogenisasi lan wektu lisis.

Jumlah Sampel A-2 gedhe banget

---- Kurangi jumlah sampel sing digunakake utawa tambahake jumlah buffer lysis.

A-1 Lisis sel utawa homogenisasi ora cukup

---- Kurangi panggunaan conto, tambahake jumlah buffer lisis, tambahake homogenisasi lan wektu lisis.

Jumlah Sampel A-2 gedhe banget

---- Waca kapasitas pamrosesan maksimal.

A-3 RNA ora diilangi kanthi lengkap saka kolom

---- Sawise nambah banyu Bebas RNase, tinggalake sawetara menit sadurunge sentrifuging.

E-4 Etanol ing eluent

---- Sawise dibilas, centrifuge maneh lan copot buffer cuci sabisa.

Media budaya sel A-5 durung rampung dibuwang

---- Nalika nglumpukake sel, priksa manawa mbusak medium budaya sabisa-bisa.

Sel-6 A-6 sing disimpen ing RNAstore ora bisa di sentrifugasi sacara efektif

---- Kapadhetan RNAstore luwih gedhe tinimbang medium budaya sel rata-rata; mula kekuwatan sentrifugal kudu ditambah. Disaranake centrifuge ing 3000x g.

Konten RNA Rendah A-7 lan akeh ing conto

---- Gunakake conto positif kanggo nemtokake asil panen sing murah disebabake sampel.

A-1 Bahane ora seger

---- Jaringan seger kudu disimpen ing nitrogen cair utawa langsung dilebokake ing reagen RNAstore kanggo njamin efek ekstraksi.

Jumlah Sampel A-2 gedhe banget

---- Ngurangi jumlah sampel.

Kontaminasi A-3 RNasen

---- Sanajan buffer sing disedhiyakake ing kit ora ngemot RNase, gampang dicemari RNase sajrone proses ekstraksi lan kudu ditangani kanthi ati-ati.

Polusi elektroforesis A-4

---- Ganti buffer elektroforesis lan priksa manawa bahan sing habis lan Loading Buffer bebas saka kontaminasi RNase.

A-5 Kakehan mbukak kanggo elektroforesis

---- Ngurangi jumlah muatan sampel, ngemot saben sumur ora luwih saka 2 μg.

Jumlah sampel A-1 gedhe banget

---- Ngurangi jumlah sampel.

A-2 Sawetara conto duwe konten DNA sing dhuwur lan bisa diobati nganggo DNase.

---- Nindakake perawatan DNase Bebas RNase menyang larutan RNA sing dipikolehi, lan RNA bisa langsung digunakake kanggo eksperimen sabanjure sawise perawatan, utawa bisa dimurnekake maneh karo kit pemurnian RNA.

Kanggo gelas, dipanggang ing suhu 150 ° C suwene 4 jam. Kanggo wadhah plastik, dicelupake ing 0,5 M NaOH sajrone 10 menit, banjur dibilas nganggo banyu tanpa RNase banjur sterilake kanggo mbusak RNase kanthi lengkap. Reagen utawa solusi sing digunakake ing eksperimen, utamane banyu, kudu bebas saka RNase. Gunakake banyu tanpa RNase kanggo kabeh persiapan reagen (tambah banyu ing botol kaca resik, tambahkan DEPC menyang konsentrasi pungkasan 0,1% (V / V), goyangake sewengi lan otoklaf).