2 × Taq PCR MasterMix Ⅱ

Premix PCR cepet kanthi efisiensi dhuwur lan resistensi stres dhuwur.

2 × Taq PCR MasterMix Ⅱ minangka prisma 2 × PCR sing siap dioptimalake lan dianyari kanthi kabeh bagean penting ing reaksi PCR kajaba template DNA lan primer.

Kucing Ora	Ukuran Kemasan
4993001	1 ml
4993002	5x1ml
4992912	20x5x1 ml
4992913	5 × 1ml
4992920	20 × 5 × 1ml
4992921	20 × 5 × 1ml

Kirim email menyang kita

Detail Produk

Tuladha Eksperimen

FAQ

Tag Produk

Fitur

■ Efisiensi amplifikasi tinggi: fragmen DNA kanthi ukuran beda (luwih murah tinimbang 5 kb) lan sumber bisa ditambah kanthi efisien.
■ Sensitivitas dhuwur: Sedhot nganti 10 pg fragmen target bisa ditambah saka cithakan genom.
■ resistensi stres sing dhuwur: Kanggo template kanthi konten impurity dhuwur kayata template / budaya bakteri sing diekstraksi kasar, fragmen target bisa ditambah kanthi gampang. Aktivitas polimerase ora bakal kena beku lan cair sing bola-bali.
■ Trep kanggo aplikasi: Sistem reaksi disiapake kanthi gampang lan cepet. Fragmen amplifikasi ngemot 3 ′ end dA-overhang, sing cocog kanggo kloning TA.

Spesifikasi

Jinis: Polimerase DNA Taq
Conto: Template / budaya bakteri sing wis dimurnikan / diekstrak kasar
Cithakan: > 10 pg
Ukuran fragmen: <5 kb
Aplikasi: Amplifikasi PCR fragmen DNA, label DNA, ekstensi primer, penentuan urutan, deteksi gen skala gedhe, eksperimen PCR semi-kuantitatif, deteksi DNA tilak, lsp.

Kabeh produk bisa disesuaikan kanggo ODM / OEM. Kanggo rincian,monggo klik Layanan Khusus (ODM / OEM)

Sedurunge: 2 × Campuran PCR sing sugih GC

Sabanjure: Sistem PCR Gampang Emas (nganggo pewarna)

Gambar 1. Cithakan saka sumber sing beda-beda ditambah karo TIANGEN Taq MasterMix II lan campuran Taq umum saka Pemasok TR kanggo ndeteksi resistensi stres reagen. Asil nuduhake manawa produk TIANGEN bisa nambah fragmen target saka template genom mentah lan budaya bakteri, lan resistensi stres luwih apik tinimbang karo Supplier TR. A: Cithakan genomik kasar sing diekstrak dening TIANGEN TIANcombi DNA Lyse & Det PCR Kit. Prp / DN: Ekstraksi kasar lan deteksi conto getih manungsa. Beras: Ekstraksi minyak mentah lan deteksi conto beras. B: PCR Koloni. Fragmen PCR 700 bp.
M: TIANGEN Marker III

Universalitas sing apik kanggo template saka macem-macem sumber lan beda dawa
Gambar 2. Fragmen saka macem-macem sumber lan dawa ditambah karo TIANGEN Taq MasterMix II (A) lan umume Taq Campuran Pemasok TK (B), Pemasok TR (C), Pemasok V (D) lan Pemasok G (E). Asil nuduhake manawa kinerja komprehensif produk TIANGEN paling apik ing babagan kemampuan amplifikasi, kekhususan lan universalitas.M: TIANGEN Marker III1: Cithakan DNA genomik kedelai (120 bp);

2-3: Cithakan DNA genomik beras (694 bp, 2258 bp);

4: Cithakan DNA genomik katun (200 bp);

5: Escherichia coli template DNA genomik (2298 bp);

6-7: Cithakan DNA genom mouse (1 kb, 2 kb);

8-10: Cithakan DNA genomik tikus (1 kb, 2 kb, 2080 bp);

11-18: Cithakan DNA genom manungsa (300 bp, 448 bp (GC%: 74.8%), 1100 bp, 750 bp,

1000 bp, 1090 bp (GC%: 70.4%), 2 kb, 4 kb)

Sensitivitas dhuwur
Gambar 3. Konsentrasi beda tikus lan fragmen DNA manungsa ditambah karo TIANGEN Taq MasterMix II (A), biasa Taq Campuran Pemasok V (B) lan Pemasok TK (C), kanggo ndeteksi sensitivitas amplifikasi. Asil nuduhake yen produk TIANGEN bisa nambah fragmen target saka template genom paling murah 0,01 ng, lan sensitivitase luwih apik tinimbang produk saka Supplier V lan TK.M: TIANGEN Marker III, N: NTCTemplate input 1-8 : 200 ng, 100 ng, 50 ng, 20 ng, 10 ng, 1 ng, 0,1 ng, 0,01 ng.

P: Ora ana band penguat

Cithakan A-1

■ Cithakan kasebut ngemot impurities protein utawa inhibitor Taq, lsp. --—Cithakan DNA murni, mbusak kotoran protein utawa ekstrak DNA template kanthi kit pemurnian.

■ denaturasi template ora lengkap ——Menakake nambah suhu denaturasi lan nambah wektu denaturasi.

■ Cithakan degradasi ——Siapake maneh cithakan.

A-2 Utami

■ Kualitas sepisanan sing kurang apik ——Rancang maneh sintesis primer.

■ Kerusakan primer ——Klik primer konsentrasi dhuwur dadi volume cilik kanggo dijaga. Supaya ora ana beku lan cair utawa jangka panjang 4 ° C.

■ Desain primer sing ora bener (kayata dawa primer ora cukup, dimer sing dibentuk ing antarane primer, lsp) -Resign primer (aja nganti pembentukan primer dimer lan struktur sekunder)

A-3 Mg²⁺konsentrasi

■ Mg²⁺ konsentrasi kurang banget ——Benerake nambah Mg²⁺konsentrasi: Ngoptimalake Mg²⁺ konsentrasi dening serangkaian reaksi saka 1 mM nganti 3 mM kanthi interval 0,5 mM kanggo nemtokake Mg optimal²⁺ konsentrasi kanggo saben template lan sepisanan.

A-4 Suhu penyemprot

■ Suhu anil sing akeh mengaruhi ikatan primer lan template. —— Ngurangi suhu anil lan ngoptimalake kondhisi kanthi gradien 2 ° C.

A-5 Wektu ekstensi

■ Wektu extension cekak —— Tambah wektu extension.

P: Positif salah

Fenomena: Sampel negatif uga nuduhake band urutan target.

Kontaminasi A-1 saka PCR

■ Kontaminasi salib saka urutan target utawa produk amplifikasi —— Ati-ati aja pipet conto sing ngemot urutan target ing sampel negatif utawa tumpahake metu saka tabung empar. Reagen utawa peralatan kudu dikonfigurasi kanthi otomatis kanggo ngilangi asam nukleat sing ana, lan anané kontaminasi kudu ditemtokake liwat eksperimen kontrol negatif.

■ Kontaminasi Reagen --— Ngatur reagen lan simpen ing suhu sithik.

A-2 Perdanar

■ Mg²⁺ konsentrasi kurang banget ——Benerake nambah Mg²⁺ konsentrasi: Ngoptimalake Mg²⁺ konsentrasi dening serangkaian reaksi saka 1 mM nganti 3 mM kanthi interval 0,5 mM kanggo nemtokake Mg optimal²⁺ konsentrasi kanggo saben template lan sepisanan.

■ Desain primer sing ora bener, lan urutan target duwe homologi kanthi urutan non-target. ——Desain desain ulang.

P: Amplikasi non-spesifik

Fenomena: Pita amplifikasi PCR ora salaras karo ukuran sing diarepake, gedhe utawa cilik, utawa kadang band amplifikasi spesifik lan band amplifikasi non-spesifik.

A-1 Primer

■ Kekhususan primer sing kurang apik

——Desain desain ulang.

■ Konsentrasi primer dhuwur banget ——Benerake nambah suhu denaturasi lan nambah wektu denaturasi.

A-2 Mg²⁺ konsentrasi

■ Ibu²⁺ konsentrasi dhuwur banget —— Ngurangi konsentrasi Mg2 + kanthi bener: Ngoptimalake Mg²⁺ konsentrasi dening serangkaian reaksi saka 1 mM nganti 3 mM kanthi interval 0,5 mM kanggo nemtokake Mg optimal²⁺ konsentrasi kanggo saben template lan sepisanan.

A-3 Polimerase paling apik

■ Jumlah enzim sing akeh banget —— Ngurangi jumlah enzim sing cocog kanthi interval 0,5 U

A-4 Suhu penyemprot

■ Suhu anil terlalu sithik —— Cocogake nambah suhu anilasi utawa nganggo metode anil rong tahap

Siklus PCR A-5

■ Siklus PCR banget —— Kurangi jumlah siklus PCR.

P: Pita tambel utawa smear

A-1 Primer——Khususan khusus —Rancang maneh primer, ganti posisi lan dawa sepisanan kanggo nambah kekhususan; utawa nindakake PCR susuh.

DNA Cithakan A-2

——Cithakan iku ora murni —— Purifikasi template utawa ekstrak DNA nganggo kit pemurnian.

A-3 Mg²⁺ konsentrasi

——Mg²⁺ konsentrasi dhuwur banget --— Nyuda nyuda Mg²⁺ konsentrasi: Ngoptimalake Mg²⁺ konsentrasi dening serangkaian reaksi saka 1 mM nganti 3 mM kanthi interval 0,5 mM kanggo nemtokake Mg optimal²⁺ konsentrasi kanggo saben template lan sepisanan.

A-4 dNTP

—— Konsentrasi dNTP dhuwur banget —— Ngurangi konsentrasi dNTP kanthi tepat

A-5 Suhu penyemprot

——Suhu anil sing sithik banget ——Menakake suhu annealing sing cocog

Siklus A-6

—— Akeh siklus --— Ngoptimalake nomer siklus

P: Pira template DNA sing kudu ditambahake ing sistem reaksi PCR 50 μl?

P: Kepiye cara nambah fragmen dawa?

Langkah pertama yaiku milih polimerase sing cocog. Polimerase Taq reguler ora bisa diowahi amarga ora ana kegiatan eksonuc please 3'-5, lan ora cocog bakal nyuda efisiensi ekstensi fragmen. Mula, polimerase Taq biasa ora bisa nambah fragmen target kanthi luwih gedhe tinimbang 5 kb. Taq polimerase kanthi modifikasi khusus utawa polimerase kesetiaan sing dhuwur kudu dipilih kanggo nambah efisiensi ekstensi lan nyukupi kebutuhan amplifikasi fragmen dawa. Kajaba iku, amplifikasi fragmen dawa uga mbutuhake penyesuaian desain primer, wektu denaturasi, wektu ekstensi, pH buffer, lsp. Biasane, primer kanthi 18-24 bp bisa nyebabake panen sing luwih apik. Kanggo nyegah kerusakan template, wektu denaturasi ing 94 ° C kudu dikurangi dadi 30 detik utawa kurang saben siklus, lan wektu paningkatan suhu nganti 94 ° C sadurunge amplifikasi kurang saka 1 menit. Kajaba iku, nyetel suhu ekstensi udakara 68 ° C lan ngrancang wektu ekstensi miturut tarif 1 kb / menit bisa njamin amplifikasi efektif fragmen dawa.

P: Kepiye cara nambah kesetiaan amplifikasi PCR?

Tingkat kesalahan amplifikasi PCR bisa dikurangi kanthi nggunakake macem-macem polimerase DNA kanthi kasetyan sing dhuwur. Antarane polimerase DNA Taq sing ditemokake nganti saiki, enzim Pfu nduweni tingkat kesalahan paling murah lan kasetyan paling dhuwur (deleng tabel sing dipasang). Saliyane pilihan enzim, peneliti luwih bisa nyuda tingkat mutasi PCR kanthi ngoptimalake kahanan reaksi, kalebu ngoptimalake komposisi buffer, konsentrasi polimerase termostable lan ngoptimalake nomer siklus PCR.

Tulis pesen sampeyan ing kene lan kirimake menyang kita